本教材由北京農(nóng)學院生物與資源環(huán)境學院生物工程系及實驗教學中心相關(guān)教師編寫。全書內(nèi)容共三章，分別為生物化學實驗技術(shù)、分子生物學實驗技術(shù)、細胞生物學實驗技術(shù)。每章又分為基礎實驗、綜合實驗、創(chuàng)新實驗三個層次的實驗，涵蓋了生物化學、分子生物學和細胞生物學的教學大綱要求，通過實驗設計、實驗材料、實驗內(nèi)容和實驗操作等方面提升學生的理論知識、實踐能力和創(chuàng)新能力。本教材在闡明相關(guān)實驗內(nèi)容的基礎上，在附錄中加入實驗室安全相關(guān)知識等內(nèi)容，增強教材的實用性。
本書可作為高等院校生物類各專業(yè)本科生和研究生生物化學、分子生物學、細胞生物學實驗教材，也可供從事生物科學工作的有關(guān)人員參考。
劉悅萍，農(nóng)學博士，2003年畢業(yè)于中國農(nóng)業(yè)大學，碩士生導師。北京市科技新星，北京市中青年骨干教師，北京市屬高等學校青年拔尖人才。主講課程本科生課程：《生物化學》和《生物化學實驗技術(shù)》，研究生課程：《生物化學與分子生物學》。主要從事果實優(yōu)質(zhì)生態(tài)安全的理論與實踐的研究，對生長素調(diào)控果實發(fā)育成熟的分子機制及果實生態(tài)安全生產(chǎn)的具體實踐措施開展相關(guān)的研究。累計發(fā)表學術(shù)論文30多篇，SCI收錄10篇。主持完成國家自然科學基金2項，北京市自然基金1項、北京市教委項目1項，北京市委組織部項目1項，北京市“菜籃子”工程項目1項。參加北京市科委項目1項，北京市自然科學基金2項。
第一章生物化學實驗技術(shù)001
第一節(jié)生物化學基礎實驗001
實驗一考馬斯亮藍G-250染料結(jié)合法測定水溶性蛋白質(zhì)含量001
實驗二酶的特異性及溫度和pH值對酶活性的影響004
實驗三淀粉酶活性的測定008
實驗四血紅蛋白的凝膠過濾色譜011
實驗五SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法測定蛋白質(zhì)分子量014
實驗六大腸桿菌16S rRNA基因的PCR及其瓊脂糖凝膠電泳檢測021
第二節(jié)生物化學綜合實驗024
實驗一雞卵黏蛋白的制備024
實驗二胰蛋白酶粗提取與活性測定031
實驗三親和色譜純化胰蛋白酶035
第三節(jié)生物化學創(chuàng)新實驗040
實驗一PcPKS1的原核表達和分離純化040
實驗二PcPKS1重組蛋白的濃縮和晶體生長049
第二章分子生物學實驗技術(shù)055
第一節(jié)分子生物學基礎實驗055
實驗一質(zhì)粒DNA的分離與純化055
實驗二紫外分光光度法測定DNA濃度和純度060
實驗三瓊脂糖凝膠電泳061
實驗四DNA的酶切、回收與連接063
實驗五大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備及轉(zhuǎn)化065
第二節(jié)分子生物學綜合實驗068
實驗一綠色熒光蛋白重組子的鑒定(菌落PCR法)068
實驗二綠色熒光蛋白的誘導表達070
實驗三綠色熒光蛋白的純化072
第三節(jié)分子生物學創(chuàng)新實驗074
實驗一重組蛋白的表達075
實驗二重組蛋白的純化及鑒定077
實驗三GST pulldown079
實驗四免疫印跡081
第三章細胞生物學實驗技術(shù)085
第一節(jié)細胞生物學基礎實驗085
實驗一葉綠體的分離以及熒光顯微鏡的使用085
實驗二細胞凝集反應089
實驗三石蠟切片的制作及HE染色092
實驗四動物細胞凋亡的誘導及檢測095
第二節(jié)細胞生物學綜合實驗099
實驗一植物細胞程序性死亡的誘導與形態(tài)觀察099
實驗二動物細胞融合102
實驗三洋蔥細胞骨架制備條件優(yōu)化及影響因素研究104
第三節(jié)細胞生物學創(chuàng)新實驗106
實驗一動物細胞系的體外培養(yǎng)107
實驗二GFP基因在HEK293T細胞中的轉(zhuǎn)染與表達111
實驗三免疫熒光技術(shù)研究蛋白質(zhì)的亞細胞定位114
實驗四利用熒光標記蛋白觀察細胞自噬117
附錄121
附錄一實驗室安全及防護知識121
附錄二易制毒化學品目錄122
附錄三易制爆危險化學品目錄124
附錄四實驗場地標志129
參考文獻134
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