目錄
前言
**篇　基礎性實驗 1
實驗1　蛋白質(zhì)的呈色反應、沉淀現(xiàn)象觀察及等電點的測定 3
實驗2　蛋白質(zhì)含量的測定 6
實驗3　蛋白質(zhì)電泳 16
實驗4　生化指標檢測 20
實驗5　胰島素、腎上腺素對家兔血糖濃度的影響 26
實驗6　酶的特異性及溫度、pH、激活劑、抑制劑對酶活性的影響 28
實驗7　兔肝堿性磷酸酶的分離純化及比活性測定 31
實驗8　質(zhì)粒DNA的提取、酶切與鑒定 36
實驗9　真核細胞基因組DNA的提取、定量和純度測定 39
實驗10　PCR擴增G6PD基因外顯子11~12片段 41
第二篇　綜合性實驗 43
實驗11　血清蛋白的鹽析及清/球比值的測定 45
實驗12　丙二酸對琥珀酸脫氫酶的競爭性抑制作用 48
實驗13　血清蛋白質(zhì)醋酸纖維素薄膜電泳分離及定量測定 50
實驗14　動脈硬化指數(shù)的計算 54
實驗15　紅細胞葡糖-6-磷酸脫氫酶活性測定及家系分析 56
實驗16　針刺足三里穴對家兔血糖濃度雙向調(diào)節(jié)作用的觀察 60
實驗17　人血漿同型半胱氨酸的測定（ELISA方法） 62
實驗18　pMD19-G6PD重組子的藍白斑篩選及酶切鑒定 64
實驗19　SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)的表觀分子質(zhì)量 68
實驗20　血紅蛋白的等電聚焦分離及其等電點測定 72
實驗21　小鼠肝細胞核的分離、純化與鑒定 77
實驗22　醋酸纖維薄膜電泳技術分離乳酸脫氫酶同工酶 80
實驗23　糖的硅膠G薄層層析分析鑒定 83
實驗24　pThioHis（A）-G6PD重組表達質(zhì)粒的鑒定 86
實驗25　G6PD重組酶的誘導表達、分離及比活性測定 89
實驗26　ATP、ADP和NADPH對G6PD酶促反應的影響 93
實驗27　小鼠肝組織總RNA提取與RT-PCR獲取真核基因片段 99
實驗28　pET-32a（＋）-G6PD重組表達質(zhì)粒的構建與鑒定 104
實驗29　小鼠G6PD的6His融合蛋白在大腸桿菌中的表達和純化 110
實驗30　6His-G6PD融合蛋白的Western Blot分析 117
實驗31　免疫共沉淀G6PD相互作用蛋白質(zhì) 121
實驗32　G6PD表觀Km值及比活性測定 125
實驗33　IEF檢測與G6PD相互作用的蛋白質(zhì)等電點 128
實驗34　SDS-PAGE分析與G6PD相互作用的免疫共沉淀產(chǎn)物 131
第三篇　創(chuàng)新設計性實驗 135
實驗35　小鼠PKCε相互作用蛋白質(zhì)的捕獲、鑒定 137
實驗36　小鼠肝臟總蛋白質(zhì)的雙向電泳分離 140
實驗37　HL-60細胞中DAPK基因甲基化狀態(tài)的檢測 144
實驗38　胰島素促進HepG2細胞對葡萄糖吸收的檢測 147
實驗39　氧化應激指標（ROS）的分析 150
實驗40　siRNA干擾人腎癌細胞G6PD表達 152
實驗41　雙熒光素酶報告實驗檢測轉(zhuǎn)錄因子對G6PD基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控 155
實驗42　乙醛脫氫酶基因突變檢測的實驗設計 158
實驗43　自毀容貌綜合征生化與分子基礎探討的實驗設計 159
實驗44　G6PD缺陷診斷及其分子基礎探討的實驗設計 160
實驗45　黑色素瘤細胞穩(wěn)定過表達人G6PD基因的實驗設計 161
參考文獻 162
附錄一　生物化學與分子生物學常用數(shù)據(jù)庫和軟件 164
附錄二　生物化學與分子生物學常用試劑和培養(yǎng)基的配制方法 166
附錄三　生物化學及分子生物學實驗常用縮略語 169
附錄四　生物化學與分子生物學實驗常用詞中英文對照 172